Buffered Listeria Enrichment Broth Base (BLEB)

李斯特菌屬(Listeria spp.)在 pH 4.4–9.6 的範圍內可生長，甚至能在此範圍外存活。菌體特徵為微需氧、革蘭氏陽性、不產孢、不具莢膜、短桿狀、具運動性（最活躍於 20°C）。食品中常與之共存的菌種包含鏈球菌（尤其是腸球菌）、微球菌、Bacillus 屬、E. coli、Pseudomonas aeruginosa 及 Proteus vulgaris。其鑑定需依賴成功分離菌株後進行生化特徵判別與血清學確認。

Listeria Enrichment Broth 是依 Lovett 等人所設計配方，以 Tryptic Soy Broth 加酵母萃取物，提供李斯特菌最佳的生長條件。其改良版本 Modified Listeria Enrichment Broth 中，選擇性劑 acriflavine 的濃度從 15 mg/L 降至 10 mg/L，以符合早期國際乳品聯盟（IDF）對乳製品檢測的建議（IDF No. 143A）。近年來，該標準已被 ISO 11290 所取代，改以 Half Fraser Broth 為增菌基礎。Buffered Listeria Enrichment Broth Base 則是添加緩衝能力的改良型，採用延遲加入選擇性劑的策略（延至培養後 4 小時添加），以提升對壓力菌株的修復效果。

# TFDA食品單核球增多性李斯特菌檢驗方法

【原廠成分表參考】

產品pH值：7.3 ± 0.1

Difco ™  Buffered Listeria Enrichment Broth Base

Approximate Formula* Per Liter

Pancreatic Digest of Casein ………………………………… 17.0  g

Soytone ……………………………………………………………. 3.0  g

Dextrose ……………………………………………………………2.5  g

Sodium Chloride ………………………………………………… 5.0  g

Dipotassium Phosphate ……………………………………….. 2.5  g

Disodium Phosphate …………………………………………..  9.6  g

Monopotassium Phosphate ………………………………….. 1.35  g

Yeast Extract ………………………………………………………6.0  g

Sodium Pyruvate ………………………………………………… 1.1  g

【特性規格】

•       脫水狀態：淺米色，自由流動，均勻一致。
•       溶液：4.8% 溶液，加熱至沸騰後可溶於純化水中。溶液呈淺至中等琥珀色，清澈至極輕微乳白狀。
•       製備後外觀：淺琥珀色，清澈至極輕微乳白狀。

【使用方法】

1. 將粉末懸浮於 1 公升純化水中：Difco™ Buffered Listeria Enrichment Broth Base – 48 克。充分混合。

2. 持續攪拌加熱至沸騰 1 分鐘，使粉末完全溶解。

3. 以 121°C 高壓滅菌 15 分鐘。

4. 對於 Buffered Listeria Enrichment Broth Base，請依照「操作程序」中的說明，分別準備下列經過過濾滅菌的溶液並添 加至基礎培養基中：

   　– 1% (w/v) Cycloheximide 溶於 40% (v/v) 乙醇水溶液中

   　– 0.5% (w/v) Acriflavine HCl 溶於純化水中

   　– 0.5% (w/v) Nalidixic Acid 溶於純化水中

5. 使用穩定且典型的對照菌株測試成品的性能。