Lysine Iron Agar

BD Difco Lysine Iron Agar

Lysine Iron Agar（賴胺酸鐵瓊脂） 是一種用於腸道菌（Enterobacteriaceae）分化鑑別的培養基，可藉由檢測菌株是否具備賴胺酸脫羧酶（decarboxylase）或脫胺酶（deaminase）活性，以及是否能產生硫化氫（H₂S），進行初步鑑別。

此培養基最早由 Edwards 和 Fife 設計，主要目的是篩檢可快速發酵乳糖的 Salmonella enterica subsp. arizonae（舊名 Arizona arizonae）。該方法也依循 Ewing 與 Edwards 所制定的腸桿菌科分類架構與鑑別標準。雖然腸桿菌科的分類學在近年已大幅更新，但 Lysine Iron Agar 仍是經典且廣泛應用的鑑別工具。

後續研究如 Johnson 等人，更將 Lysine Iron Agar 搭配 Kligler Iron Agar 或 Triple Sugar Iron Agar（TSI）使用，以增強對 Salmonella、Shigella 與 Arizona group 菌株的鑑別力，特別適用於糞便樣本中致病菌的篩檢。

【培養基原理】

• 葡萄糖（Dextrose）提供可發酵的醣類來源。
• pH 指示劑 bromcresol purple 會在 pH ≤ 5.2 時呈現黃色，而在 pH ≥ 6.8 時呈紫色，用於判讀酸鹼反應。
• 賴胺酸（Lysine）是用於偵測賴胺酸脫羧酶與脫胺酶作用的底物。
• 硫代硫酸鈉與檸檬酸鐵銨可指示 H₂S 產生，形成黑色沉澱。

▶︎ 結果表示方式

• 能產生離胺酸脫羧酶的菌株，在管底（butt）會呈紫色或中性反應。
• 能進行脫胺反應的菌株，在斜面（slant）會呈紅色，而底部維持酸性（黃色）。
• 能產生硫化氫（H₂S）的菌株則會使培養基出現黑色沉澱。
• 有些菌株可產氣，但氣體生成常呈不規則或受抑制狀態。

此培養基通常與其他鑑別培養基（如 TSI）聯用使用，以提升分辨能力與鑑別準確性，廣泛應用於食品、環境與臨床樣本中致病性腸桿菌的初步鑑定。

【原廠成分表參考】

pH 6.7 ± 0.2

Difco ™ Lysine Iron Agar
Approximate Formula* Per Liter
Peptone …………………………………………………………….5.0 g
Yeast Extract ………………………………………………………3.0 g
Dextrose ……………………………………………………………1.0 g
L-Lysine HCl ……………………………………………………..10.0 g
Ferric Ammonium Citrate …………………………………….. 0.5 g
Sodium Thiosulfate …………………………………………….. 0.04 g
Bromcresol Purple ………………………………………………. 0.02 g
Agar ………………………………………………………………. 15.0 g

【特性規格】

• 脫水狀態（Dehydrated Appearance）：呈米色至帶綠米色，質地均勻且易流動。
• 溶液狀態（Solution）：按建議濃度（3.45%）溶解於純化水中，加熱煮沸後可完全溶解，所得溶液為紅紫色，呈略微乳白。
• 配置後外觀（Prepared Appearance）：完成後的培養基呈紫色，略帶乳白混濁，屬正常現象，適用於鑑別腸道致病菌株之代謝反應。

【使用方法】

1. 秤取脫水培養基粉末並加入 1 公升純化水中：Difco™ Lysine Iron Agar：34.5 克, 充分混合均勻。
2. 加熱並持續攪拌，使其煮沸 1 分鐘，直到粉末完全溶解。
3. 將溶液置於 121°C 高壓滅菌 12 分鐘。
4. 滅菌後，將培養基倒入試管中並斜放冷卻，形成斜面與深層管底（slant with deep butt)結構，供代謝反應觀察使用。
5. 使用穩定且具代表性的品質控制菌株進行成品質質測試，以確保培養基的反應效能與可靠性。