Decarboxylase Medium Base

BD Difco Decarboxylase Medium Base 

Decarboxylase Medium Base 用於鑑別腸內革蘭氏陰性桿菌（Gram-negative enteric bacilli），透過細菌是否產生脯胺酸（ornithine）、離胺酸（lysine）或精胺酸（arginine）脫羧酶進行區分。此培養基在加入特定胺基酸後，可進行對應的生化反應，用以協助鑑別 Escherichia coli、Enterobacter, Salmonella, Shigella、Klebsiella 等重要腸內菌屬。

Moeller 最早提出使用脫羧酶培養基來偵測上述三種酵素的產生，為腸內菌科（Enterobacteriaceae）及其他革蘭氏陰性菌的重要鑑別工具之一。後續 Falkow 根據 Moeller 配方改良出以中性環境進行反應的培養基，更適用於多數腸內菌；但研究指出，Moeller 配方在分辨 Klebsiella 與 Enterobacter 時更為準確，應視作參考標準配方。

Moeller 配方亦可應用於鑑別如 Aeromonas、Plesiomonas、Vibrio 與非發酵性革蘭氏陰性桿菌。Decarboxylase Medium Base 為 Falkow 改良配方的基礎版，而 Lysine Decarboxylase Broth 則是在此基礎上加入 0.5% L-lysine 而成。

【培養基原理】

Decarboxylase 培養基由腖、牛肉或酵母萃取物構成，提供基本生長營養；pyridoxal（維生素B6衍生物）為酵素輔因子，葡萄糖作為可發酵碳源，溴麥芽素紫（bromcresol purple）或cresol red作為pH指示劑。當細菌發酵葡萄糖產酸，培養基由紫轉黃，酸性條件刺激脫羧酶活性，若該菌具脫羧能力，會將胺基酸代謝為胺類（如 cadaverine、putrescine），導致 pH 升高，指示劑顏色再由黃轉回紫色。

• Lysine → cadaverine（腐胺）
• Ornithine → putrescine（屍胺）
• Arginine → ornithine → putrescine

若細菌無脫羧能力，則培養基維持酸性黃色。

🔺每株菌需同時接種一管未含胺基酸的對照管，如對照管出現鹼性反應則該試驗無效。為防止空氣造成表面鹼化，產生假陽性反應，接種後應覆蓋一層無菌礦物油以隔絕空氣。

【原廠成分表參考】

pH 6.8 ± 0.2

Difco ™ Decarboxylase Medium Base
Approximate Formula* Per Liter
Peptone …………………………………………………………….5.0 g
Yeast Extract ………………………………………………………3.0 g
Dextrose ……………………………………………………………1.0 g
Bromcresol Purple ………………………………………………. 0.02 g

【特性規格】

• 脫水狀態（Dehydrated Appearance）：呈淡米色，質地均勻，具良好流動性。
• 溶液狀態（Solution）：以 0.9% 濃度溶於純水中，經加熱可完全溶解。溶液呈紫色，澄清透明。
• 配製後外觀（Prepared Appearance）：培養基應呈紫色、澄清透明狀態，無混濁或沉澱。

圖片取自BD Manual

【使用方法】

1. 取 9 公克培養基粉末，加入 1 公升純水中，加熱至完全溶解。
2. 根據需求，加入：
     - 5 公克 L-型胺基酸，或
     - 10 公克 DL-型胺基酸（如 L-lysine、L-ornithine 或 L-arginine），再加熱至完全溶解。
     如有需要，調整 pH 至適當範圍（通常約 pH 6.0–6.8）。
3. 將配製完成的培養基進行 121°C 高壓滅菌 15 分鐘。
4. 滅菌後，使用穩定且具代表性的對照菌株進行性能測試，以驗證培養基是否具備良好的脫羧反應觀察效果。