B12 Assay Medium

B12 Assay Medium 是一種專用培養基，用於以微生物分析法測定維生素 B12 的含量。本產品符合美國藥典（USP）性能規範，適用於藥品與營養品中的維生素 B12 檢驗。

➡️微生物分析法廣泛應用於維生素定量，使用的培養基分為三類：

維持培養基（Maintenance Media）：用於保存菌種，使其在分析前保持活性與敏感性。

接種培養基（Inoculum Media）：用於使試驗菌種活化，方便立即用於測定。

測定培養基（Assay Media）：用於真正的維生素定量，只缺目標維生素，其餘養分充足，可供試驗菌生長。

B12 Assay Medium 屬於第 3 類，專為測定維生素 B12（又稱鈷胺素，Cobalamin）而設計。

➡️此培養基依據下列官方程序設計：

USP – Vitamin B12 Activity Assay

AOAC – Cobalamin (Vitamin B12 Activity) Assay

指定使用的測試菌株為：

Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis ATCC™ 7830（亦稱 Lactobacillus leichmannii）

【培養基原理】

•       B12 Assay Medium 為不含維生素 B12 的脫水培養基，內含支援目標菌生長的所有其他營養素與維生素。
•       當加入不同濃度的 USP 氰鈷胺（Cyanocobalamin）標準品後，試驗菌會根據 B12 含量表現出不同生長量。
•       此生長反應可透過 比濁法（turbidimetry） 或 滴定法（titrimetry） 進行量測與比對標準曲線，以達到 B12 含量的定量目的。
•       氯化鈉（Sodium chloride）：維持滲透壓平衡。

【原廠成分表參考】

產品pH值：6.0 ± 0.1

Difco B12 Assay Medium

Approximate Formula* Per Liter

Vitamin Assay Casamino Acids ……………………………. 15.0  g

Dextrose ………………………………………………………….40.0  g

Asparagine ………………………………………………………… 0.2  g

Sodium Acetate ……………………………………………….. 20.0  g

Ascorbic Acid …………………………………………………….. 4.0  g

L-Cystine …………………………………………………………… 0.4  g

DL-Tryptophan ……………………………………………………0.4  g

Adenine Sulfate ……………………………………………….. 20.0  mg

Guanine Hydrochloride ……………………………………… 20.0  mg

Uracil ……………………………………………………………… 20.0  mg

Xanthine …………………………………………………………. 20.0  mg

Riboflavin  ………………………………………………………….. 1.0  mg

Thiamine Hydrochloride ………………………………………. 1.0  mg

Biotin  …………………………………………………………….. 10.0  µg

Niacin ………………………………………………………………. 2.0  mg

p-Aminobenzoic Acid ………………………………………….. 2.0  mg

Calcium Pantothenate …………………………………………. 1.0  mg

Pyridoxine Hydrochloride ……………………………………… 4.0  mg

Pyridoxal Hydrochloride ……………………………………….. 4.0  mg

Pyridoxamine Hydrochloride ……………………………… 800.0  µg

Folic Acid ………………………………………………………. 200.0  µg

Monopotassium Phosphate ………………………………….. 1.0  g

Dipotassium Phosphate ……………………………………….. 1.0  g

Magnesium Sulfate …………………………………………….. 0.4  g

Sodium Chloride ………………………………………………. 20.0  mg

Ferrous Sulfate …………………………………………………. 20.0  mg

Manganese Sulfate …………………………………………… 20.0  mg

Polysorbate 80 …………………………………………………… 2.0  g

【特性規格】

•        脫水粉末外觀：非常淺至淺米色，質地均勻，有結塊傾向。
•        溶液狀態（4.25% 單倍濃度溶液）：在煮沸 2–3 分鐘時可溶於純化水。溶液呈淺琥珀色、澄清，可能含有些微沉澱。
•        配製後外觀：非常淺至淺琥珀色，澄清，可能有些微沉澱。

【使用方法】

1.         將 8.5 克粉末懸浮於 100 毫升純化水中。

2.         持續攪拌加熱並煮沸 2–3 分鐘，使粉末完全溶解。

3.         分裝至每管 5 毫升，並均勻分散沉澱物。

4.         加入標準品或待測樣品。

5.         使用純化水將每管體積補足至 10 毫升。

6.         於 121°C 高壓滅菌 5 分鐘。