Triple Sugar Iron Agar (TSIA)

Triple Sugar Iron Agar（TSI Agar）用於區分革蘭氏陰性腸道桿菌(如Enterobacteriaceae腸桿菌科)，根據其碳水化合物的發酵能力及是否產生硫化氫（H₂S）。TSI Agar 主要用於鑑定革蘭氏陰性桿菌時，檢測其對碳水化合物的發酵能力與硫化氫產生情形。由 Hajna 在 Kligler Iron Agar（僅含乳糖與葡萄糖）基礎上添加蔗糖而成。此改良配方提高培養基靈敏度，可偵測會發酵蔗糖、乳糖及/或葡萄糖的菌株。

▶︎發酵作用：會釋放酸性物質，讓指示劑酚紅從紅色變為黃色，若產生氣體，可見氣泡或縱裂現象。

▶︎產氣與產硫：產生硫化氫會與硫酸亞鐵銨作用，在試管底部形成黑色沉澱。

【培養基原理】

含有 三種糖類：葡萄糖（dextrose）、乳糖（lactose）與蔗糖（sucrose）

▶︎含酚紅（phenol red）作為 pH 指示劑

▶︎含硫酸亞鐵銨（ferrous ammonium sulfate）檢測硫化氫產生（變黑）

重點提醒–

1.         葡萄糖濃度 僅為蔗糖與乳糖的 1/10，可幫助區分「只發酵葡萄糖」的菌種

2.         在試管上層（斜面 slant）因氧氣較多，少量酸會快速氧化使 pH 轉為鹼性，顯紅色

3.         在下層（底部 butt）因氧氣較少，酸性維持，呈黃色

   圖片取自BD Manual

【原廠成分表參考】

產品pH值：7.4 ± 0.2

Difco ™  Triple Sugar Iron Agar

Approximate Formula* Per Liter

Beef Extract ………………………………………………………..3.0   g

Yeast Extract ………………………………………………………3.0   g

Pancreatic Digest of Casein ………………………………… 15.0   g

Proteose Peptone No. 3 ……………………………………….. 5.0   g

Dextrose ……………………………………………………………1.0   g

Lactose …………………………………………………………… 10.0   g

Sucrose ……………………………………………………………10.0   g

Ferrous Sulfate ……………………………………………………0.2   g

Sodium Chloride ………………………………………………… 5.0   g

Sodium Thiosulfate …………………………………………….. 0.3   g

Agar ………………………………………………………………. 12.0   g

Phenol Red………………………………………………………. 24.0  mg

【特性規格】

•        脫水培養基外觀：粉紅色，自由流動，均勻一致。
•        溶液：6.5% 溶液，可在沸騰時溶解於純化水中。溶液為紅色，非常輕微乳白混濁，可能含有少量深棕色沉澱物。
•        配製後外觀：紅色，輕微乳白混濁。

【使用方法】

1.將 65 公克培養基粉末懸浮於 1 公升純化水中。充分混合。

2.持續攪拌加熱並煮沸 1 分鐘，使粉末完全溶解。

3.分裝至試管中，並於 121°C 高壓滅菌 15 分鐘。

4.冷卻時保持試管傾斜的角度，以形成較深的底部（butt）。

5.使用穩定且具代表性的標準菌株，測試最終產品的性能。