PPLO Agar (Mycoplasma Agar)

BD Difco PPLO Agar

經過營養補充的 PPLO (Mycoplasma) 瓊脂和肉湯用於分離和培養黴漿菌 (Mycoplasma)。其中，Mycoplasma Broth Base (Frey) 專為培養禽類黴漿菌設計。

黴漿菌屬於柔膜菌綱，最初在牛的胸膜肺炎病例中被發現，因此被稱為「胸膜肺炎樣生物」或 PPLO。儘管有些種類是人體呼吸道的正常菌群，但肺炎黴漿菌 (M. pneumoniae) 是導致呼吸道疾病（原發性非典型肺炎，俗稱「行走的肺炎」）的主要原因。此外，人型黴漿菌 (M. hominis)、生殖道黴漿菌 (M. genitalium) 和尿素分解脲漿菌 (Ureaplasma urealyticum) 則是人類生殖道的重要定殖菌（及潛在病原體）。

PPLO (Mycoplasma) Agar 由 Morton、Smith 和 Leberman 描述，用於研究黴漿菌的生長需求、鑑定和培養。PPLO (Mycoplasma) Broth (不含結晶紫) 則依 Morton 和 Lecci 的配方製備，因結晶紫對某些黴漿菌有抑制作用而被省略，主要用於研究領域的黴漿菌培養。Mycoplasma Broth Base (Frey) 是其他肉湯培養基的改良版，專為培養禽類黴漿菌株而開發。

Mycoplasma Supplement 和 Mycoplasma Enrichment w/o Penicillin 是無菌乾燥的添加劑，用於 PPLO 培養基中，這些補充劑依 Chanock、Hayflick 和 Barile 以及 Hayflick 的配方製備。

【培養基原理】

這些培養基中的肉類消化物、蛋白腖、牛肉提取物和酵母提取物提供氮、維生素、胺基酸和碳。氯化鈉維持滲透壓平衡。PPLO (Mycoplasma) Agar 中的瓊脂固化劑濃度略低於常規，以確保形成盡可能大的菌落，因為黴漿菌主要向瓊脂內部生長，表面生長較少。

基礎培養基需添加 Mycoplasma Supplement 或 Mycoplasma Enrichment w/o Penicillin，因為黴漿菌屬對生長條件要求嚴苛。Mycoplasma Supplement 含有新鮮酵母提取物和馬血清。酵母提取物提供黴漿菌屬所需的預製核酸前體，而馬血清則提供膽固醇，作為生長刺激劑。

Mycoplasma Enrichment without Penicillin 是一種選擇性富集劑，含有抑制劑醋酸鉈 (thallium acetate)，使用時可額外添加青黴素（如青黴素 G 或廣譜半合成青黴素），使其對革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌具有選擇性抑制作用。

【原廠成分表參考】

產品pH值：7.8 ± 0.2

Difco ™  PPLO Agar

Approximate Formula* Per Liter

Beef Heart, Infusion from 50 g ……………………………… 6.0  g

Peptone ………………………………………………………….. 10.0  g

Sodium Chloride ………………………………………………… 5.0  g

Agar ………………………………………………………………. 14.0  g

※補充劑283610 / Difco Mycoplasma Supplement, Vial – 6 x 30 mL

※補充劑212292/ BBL ™  Mycoplasma Enrichment w/o Penicillin, Vial – 10 x 30 mL*

【特性規格】

• 脫水粉末外觀：米色，質地均勻，呈自由流動狀。
• 溶液狀態（5% 濃度溶液）：在煮沸時可溶於純化水。溶液呈中等琥珀色，略帶乳光狀。
• 配製後外觀（添加 30% Mycoplasma 補充劑後）：呈淺至中等琥珀色，略帶乳光狀。

【使用方法】

1. 將 35 克粉末溶解於 700 毫升純化水中，充分混合。
2. 於 121°C 高壓滅菌 15 分鐘。將培養基冷卻至 50–60°C。
3. 無菌操作下，加入 300 毫升 Difco Mycoplasma 補充劑，充分混合。
4. 如有需要，可添加選擇性抑制劑（例如：thallium acetate或penicillin）。
5. 使用穩定、典型的對照菌株測試成品的性能。