M9 Minimal Salts, 5×

BD Difco M9 Minimal Salts, 5× 

M9 Minimal Salts, 5× 是一種濃縮型基礎鹽類培養基（5 倍濃縮），稀釋為 1× 並加入適當碳源（如葡萄糖）後，即可製備成 M9 Minimal Medium，常用於培養重組型大腸桿菌（Escherichia coli）。

M9 為化學成分明確（chemically defined）的最小培養基，僅提供細胞維持基本生長所需的營養條件，適合篩選需特定營養補充的菌株（如 auxotroph）。此外，M9 亦常用於質體正向選殖壓力維持、F′ 質體菌株培養（搭配 M13 噬菌體實驗），並可依需求補充胺基酸、維生素或特定代謝物以進行功能性篩選。

▶︎其配方設計重點如下：

• 磷酸鈉與磷酸鉀作為緩衝劑，穩定 pH；

• 氯化銨提供氮源；

• 氯化鈉供應細胞必需離子；

• 可添加葡萄糖作為碳源；

• 若需促進重組菌生長，可補充鎂與鈣離子（如 MgSO₄ 與 CaCl₂）。

M9 培養基為重組大腸桿菌研究中的標準選擇，特別適用於基因工程、代謝控制、合成生物學與質體篩選實驗。

【原廠成分表參考】

pH 6.8 ± 0.2

Difco ™ M9 Minimal Salts, 5×
Approximate Formula* Per Liter
Disodium Phosphate (anhydrous) ………………………… 33.9 g
Monopotassium Phosphate ………………………………… 15.0 g
Sodium Chloride ………………………………………………… 2.5 g
Ammonium Chloride …………………………………………… 5.0 g

【特性規格】

• 脫水狀態（Dehydrated Appearance）：呈白色，質地均勻、易流動。

• 溶液狀態（Solution）：按 5.64% 濃度溶解於純化水中，完全可溶，所得溶液為無色、澄清，無明顯沉澱。

• 配置後外觀（Prepared Appearance）：維持無色透明、無明顯沉澱，為理想狀態，適合後續稀釋與補充碳源使用。

【使用方法】

M9 最小培養基（M9 Minimal Medium）

▶︎製備 M9 Minimal Salts, 5× 濃縮液

1. 秤取 56.4 克粉末溶於 1 公升純化水中，充分混合溶解。
2. 置於 121°C 高壓滅菌 15 分鐘。冷卻後備用。

▶︎製備 M9 Minimal Medium（使用 5× 濃縮液）

1. 取 200 mL 滅菌後的 M9 Minimal Salts, 5× 濃縮液，加入 750 mL 經滅菌並冷卻至 45–50°C 的純化水中，再補足至 1 公升總體積。
2. 無菌操作下加入以下成分，充分混合：
    - 20 mL 無菌 20% 葡萄糖濾過液（碳源）
    - 2 mL 無菌 1.0 M MgSO₄ 溶液（鎂離子）
    - 0.1 mL 無菌 1.0 M CaCl₂ 溶液（選擇性添加，鈣離子）
3. 如有需求，可再補充特定胺基酸或代謝物（例如用於 auxotroph 篩選）。
4. 使用穩定、典型的對照菌株進行測試，確認成品培養基的效能與支持性。