BCYE Agar Base

BD BBL BCYE Agar Base

BCYE（Buffered Charcoal Yeast Extract）Agar 及其衍生選擇性配方，廣泛用於臨床檢體與環境樣品中退伍軍人菌（Legionella spp.）的分離與培養。其系列產品包含基本型、選擇型與鑑別型，可依樣品背景菌複雜度與鑑別需求彈性應用。

BCYE Agar 為 Edelstein 於1981年在 Charcoal Yeast Extract（CYE）基礎上改良而成，添加 α-ketoglutarate 與 ACES 緩衝液，提高對 L. pneumophila 的回收率。

▶︎Legionella Agar 為 BCYE 的緩衝液濃度改良版本（ACES 由 10 g/L 調降至 6 g/L）。

▶︎BCYE Differential Agar 含有 溴甲酚紫與溴百里酚藍兩種染料，可透過菌落顏色與型態進行初步分辨與推測鑑別。

▶︎BCYE Selective Agar with CCVC（Cephalothin, Colistin, Vancomycin, Cycloheximide）：提升環境水樣中 L. pneumophila 的檢出率，常搭配酸洗前處理以抑制雜菌。

▶︎BCYE Selective Agar with PAC（Polymyxin B, Anisomycin, Cefamandole）：適用於臨床或飲用水樣本，能有效對抗混合菌群背景。

▶︎BCYE Selective Agar with PAV：與 PAC 類似，但改為添加 vancomycin 並減半 polymyxin B 濃度，以平衡抗菌範圍與菌株回收率。

【培養基原理】

所有培養基的基礎配方皆為 BCYE Base，具以下核心成分與功能：

• 酵母萃取物：提供生長所需的氮、碳與維生素。
• L-半胱胺鹽酸鹽、焦磷酸鐵、α-酮戊二酸：滿足軍團菌的特殊營養需求。
• 活性碳：可分解有害的過氧化氫，並調節培養環境中二氧化碳與表面張力，有利菌落發育。
• 緩衝液（ACES）：穩定培養基pH值，促進最佳生長。
• 抗生素與抗黴劑（依配方而異）：選擇性抑制革蘭氏陽性菌、陰性菌與真菌，避免背景菌干擾。
• 染料添加（於Differential Agar中）：輔助菌落型態與顏色辨識。

【原廠成分表參考】

pH 6.85 ± 0.1 (adjusted)

BBL ™ BCYE Agar Base
Approximate Formula* Per Liter
Yeast Extract …………………………………………………….10.0 g
Ferric Pyrophosphate …………………………………………… 0.25 g
ACES Buffer ……………………………………………………..10.0 g
Charcoal, Activated …………………………………………….. 2.0 g
Alpha-Ketoglutarate ……………………………………………. 1.0 g
Agar ………………………………………………………………. 15.0 g

【特性規格】

• 脫水粉末外觀為細至粗粒狀，質地均勻，無異物。
• 配製成 3.83% 濃度溶液時，可於沸水中完全溶解，溶液呈深色，介於黑綠色至灰黑色之間，外觀中度混濁至不透明。
• 培養基製備完成後亦呈深黑綠至灰黑色，透明度為中等混濁至完全不透明，為正常狀態。

【使用方法】

1. 製備鹼性溶液：先取 500 mL 純水，加入 2.4 克氫氧化鉀（KOH）顆粒，攪拌至完全溶解。
2. 混合主成分：再加入 38.3 克 BCYE 培養基粉末及額外 500 mL 純水，充分混合均勻。
3. 加熱溶解：持續攪拌加熱至沸騰，煮沸 1 分鐘，使粉末完全溶解。
4. 高壓滅菌：以 121°C 高壓滅菌 15 分鐘。
5. 添加關鍵營養素：冷卻至 45–50°C 時，無菌條件下加入 4 mL 的 10% 經濾膜無菌處理之 L-半胱胺鹽酸鹽（L-cysteine HCl）溶液。
6. 調整 pH 值：充分混合後檢測 pH 值，應為 6.85 ± 0.1，若偏離則使用 1 N HCl 或 KOH 微調。
7. 分裝培養皿：分裝入無菌培養皿中，倒皿時須持續輕搖保持活性碳懸浮均勻。
8. 效能測試：使用穩定且具代表性的標準菌株進行性能測試，確保培養基品質與功能。