BBL Coagulase 凝固酶試驗 兔血漿Rabbit Plasma
貨號 240827
BD Coagulase Plasma 是用於鑑定金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是否產生凝固酶(coagulase)的專用試劑。凝固酶是S. aureus重要的致病因子之一,能轉化血漿中的纖維蛋白原(fibrinogen)為纖維蛋白(fibrin),形成凝塊。
主要用途用途
用於定性鑑定金黃色葡萄球菌(S. aureus)的凝固酶產生能力,適用於直接試管法(Direct Tube Method)
產品型態
冷凍乾燥(lyophilized)兔血漿,含 0.15% EDTA 和約 0.85% 氯化鈉
【亮點優勢】
✔︎ 高特異性:使用 EDTA 作為抗凝劑,可避免某些細菌(如 Pseudomonas spp.、Serratia marcescens 等)利用檸檬酸鹽導致的假陽性反應
✔︎ 靈敏度高:能有效檢測金黃色葡萄球菌產生的自由凝固酶
✔︎ 操作簡便:適用於常規的試管法操作流程
✔︎ 品質穩定:冷凍乾燥形式便於長期保存與運輸
【檢測原理】
凝固酶試驗是根據菌體或外泌凝固酶使兔血漿凝固的能力來判別。S. aureus產生的酵素能與血漿中的凝固因子(如CRF)結合,使血漿凝固,形成凝塊或凝絲。
依試驗方式分為:
- 玻片法(Slide Test):檢測clumping factor(結集因子,細胞表面結合型凝固酶)
- 試管法(Tube Test):檢測free coagulase(自由凝固酶,由菌體分泌)
【使用方法】
A. 先將產品回溶(Reconstitution)
- 準備:使用無菌純水(sterile purified water)
- 操作:每瓶加入 3 mL 無菌純水
- 輕輕翻轉瓶身混合,避免劇烈搖晃,以防止蛋白質變性
注意:回溶後的血漿應為均勻透明液體,若出現混濁或凝塊,請勿使用
保存:回溶後產品;可在 2–8°C 冷藏保存最多 14 天或分裝後立即於 -20°C 冷凍保存,最多 30 天,請勿重複冷凍與解凍,以免影響產品效能。
B. 實驗建議使用流程:(仍應遵循原廠說明書為正確方法)
B-1 Direct Tube Method 試管法 – 適用於檢測自由凝固酶(Free Coagulase)
準備
- 回溶BD Coagulase Plasma(3 mL 無菌水)
- 使用乾淨無菌試管
接種菌株
- 取1–2環新鮮純菌落
- 接入 0.5–1.0 mL 回溶後血漿中
孵育
- 置於 37°C 培養箱或水浴中
- 觀察時間為 4 小時
判讀反應
✅ 陽性:形成凝塊,不易流動
❌ 陰性:液體仍可自由流動
⏱ 若陰性,可延長觀察至24小時
注意:必要時搭配陽性與陰性對照菌株確認實驗有效性
B-2 Slide Coagulase Test 玻片法- 適用於快速初篩結集因子(Clumping Factor)
滴加血漿
- 取潔淨玻片
- 各點1小滴已回溶血漿
加入菌落
- 一滴加測試菌
- 一滴加陽性對照菌(如S. aureus)
攪拌混合
使用木棒或拋棄式攪拌棒,輕柔攪拌
觀察反應
✅ 陽性:10秒內出現明顯凝集顆粒
❌ 陰性:無凝集或混濁但均勻
提示:如發現陰性結果,仍需進一步使用試管法確認。
